產(chǎn)品介紹
細(xì)胞名稱:人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞長春新堿耐藥株
形態(tài)特性:上皮樣;多角形
生長特性:貼壁生長
特征特性:長春新堿耐藥。
培養(yǎng)條件: RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS + 2000ng/ml長春新堿
傳代方法: 1:4~1:8傳代,2~3天換液1次。
傳代情況:
凍存條件:基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+38%FBS
產(chǎn)品名稱 | 人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞長春新堿耐藥株 |
英文簡稱 | HCT-8/V |
狀態(tài) | 貼壁 |
細(xì)胞冷凍保存:
1.凍存液:92%完全培養(yǎng)基+8%DMSO(可以根據(jù)實驗室條件自行選擇)
2.降溫步驟:4度10min,-20度2h,-80過夜后液氮保存。
細(xì)胞培養(yǎng)的操作步驟:
1.人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞長春新堿耐藥株吸走用于培養(yǎng)基,加入3-5mL PBS后輕輕晃動培養(yǎng)瓶潤洗細(xì)胞;
2.吸干凈PBS后加入1mL 0.25%胰酶-0.53mM EDTA,輕輕搖晃培養(yǎng)皿使胰酶浸沒細(xì)胞表面,培養(yǎng)瓶放37度培養(yǎng)箱消化;
(細(xì)胞對于消化比較敏感,消化過度會嚴(yán)重影響細(xì)胞狀態(tài),導(dǎo)致細(xì)胞傳代死亡漂浮或者傳代后不長。細(xì)胞消化到細(xì)胞間隙變大但未脫落,可以輕輕吹下時即可終止,禁止消化到細(xì)胞完全漂浮?;靹蚣?xì)胞時盡量輕柔,不要吹出大量氣泡。)
3.加入6-8ml完全培養(yǎng)基終止消化,輕輕吹下細(xì)胞混勻;
4.將混勻的細(xì)胞1000rpm(約150g)離心3min,棄上清,再用新鮮培養(yǎng)基重懸37度培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng);
傳代比例: 不同細(xì)胞生長速度不一,具體傳代比例視細(xì)胞生長速度而定,大部分細(xì)胞適用1:3-1:4傳代,生長較慢的細(xì)胞可以1:2傳代。