產(chǎn)品介紹
細(xì)胞名稱:人類原巨核細(xì)胞型白血病細(xì)胞
形態(tài)特性:圓形
生長(zhǎng)特性:懸浮生長(zhǎng),有1%~2%的細(xì)胞可輕微貼壁。
特征特性:該細(xì)胞于1988年建系;源于一名64歲患有急性粒細(xì)胞白血?。ˋML M7)的男性的骨髓;對(duì)多種細(xì)胞因子有反應(yīng)。
培養(yǎng)條件: RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS;5-7u/ml Epo
傳代方法:維持細(xì)胞濃度在1.0~1.5×106 cells/ml,1:
2傳代,2~3天1次。
傳代情況: C7
凍存條件:基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
產(chǎn)品名稱 | 人類原巨核細(xì)胞型白血病細(xì)胞 |
英文簡(jiǎn)稱 | UT-7 |
狀態(tài) | 貼壁 |
細(xì)胞冷凍保存:
1.凍存液:92%完全培養(yǎng)基+8%DMSO(可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)室條件自行選擇)
2.降溫步驟:4度10min,-20度2h,-80過夜后液氮保存。
細(xì)胞培養(yǎng)的操作步驟:
1.人類原巨核細(xì)胞型白血病細(xì)胞吸走用于培養(yǎng)基,加入3-5mL PBS后輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶潤(rùn)洗細(xì)胞;
2.吸干凈PBS后加入1mL 0.25%胰酶-0.53mM EDTA,輕輕搖晃培養(yǎng)皿使胰酶浸沒細(xì)胞表面,培養(yǎng)瓶放37度培養(yǎng)箱消化;
(細(xì)胞對(duì)于消化比較敏感,消化過度會(huì)嚴(yán)重影響細(xì)胞狀態(tài),導(dǎo)致細(xì)胞傳代死亡漂浮或者傳代后不長(zhǎng)。細(xì)胞消化到細(xì)胞間隙變大但未脫落,可以輕輕吹下時(shí)即可終止,禁止消化到細(xì)胞完全漂浮。混勻細(xì)胞時(shí)盡量輕柔,不要吹出大量氣泡。)
3.加入6-8ml完全培養(yǎng)基終止消化,輕輕吹下細(xì)胞混勻;
4.將混勻的細(xì)胞1000rpm(約150g)離心3min,棄上清,再用新鮮培養(yǎng)基重懸37度培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng);
傳代比例: 不同細(xì)胞生長(zhǎng)速度不一,具體傳代比例視細(xì)胞生長(zhǎng)速度而定,大部分細(xì)胞適用1:3-1:4傳代,生長(zhǎng)較慢的細(xì)胞可以1:2傳代。