蕎麥源性成分PCR檢測試劑盒 PCR-熒光探針法反應五要素

蕎麥源性成分PCR檢測試劑盒 PCR-熒光探針法反應五要素：

參加PCR反應的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+

引物：引物是PCR特異性反應的關鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則：

①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。

②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。

③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。

④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結構，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴增條帶。

⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)第二個堿基，應嚴格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。

⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。

⑦引物的特異性：引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。

引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產(chǎn)生所需要的結果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。

甲胎蛋白抗體alpha 1 Fetoprotein

毛細血管擴張性共濟失調(diào)癥突變蛋白抗體ATM

ATP結合盒轉運蛋白2抗體ABCF2

肌動蛋白結合蛋白LIM蛋白3抗體ABLIM3

酸性鈣調(diào)蛋白3抗體Acidic Calponin

磷酸化CD156b抗體phospho-ADAM17 (Thr735)

乙醇脫氫酶5抗體ADH5

乙醇脫氫酶6抗體ADH6

溶血磷脂?；D移酶5抗體AGPAT5

遺傳性失明相關蛋白AIPL1抗體AIPL1

免疫調(diào)節(jié)蛋白AIRE抗體AIRE

磷酸化蛋白激酶AKT1抗體phospho-AKT1 (Ser473)

磷酸化蛋白激酶AKT1抗體phospho-AKT1 (Thr72)

磷酸化蛋白激酶AKT1抗體phospho-AKT1 (Tyr326)

乙醛脫氫酶2型抗體ALDH1A2

γ-氨基丁酸醛脫氫酶抗體ALDH9A1

衰老相關蛋白5抗體AGPS

磷酸化熱休克蛋白β5/αb晶體蛋白質(zhì)/α-晶體蛋白b鏈抗體phospho-alpha B Crystallin (Ser59)

釉基質(zhì)蛋白抗體AMBN

磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶α2抗體phospho-AMPK alpha 2 (Ser176)

磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶α2抗體phospho-AMPK alpha 2 (Ser491)

磷酸化雄激素受體抗體phospho-Androgen Receptor (Ser515)

磷酸化雄激素受體抗體phospho-Androgen Receptor (Ser791)

磷酸化雄激素受體抗體phospho-Androgen Receptor (Ser94)

磷酸化雄激素受體抗體phospho-Androgen Receptor (Tyr363)