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豬松弛肽/松弛素(RLN)elisa試劑盒操作步驟發(fā)表時(shí)間:2021-09-22 15:37 豬松弛肽/松弛素(RLN)elisa試劑盒操作步驟: 1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,在di一、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,然后在di一、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后從di一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為180 ng/L,120 ng/L ,60 ng/L,30 ng/,15 ng/L)。 2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。 3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。 4. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。 5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。 6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。 7. 溫育:操作同3。 8. 洗滌:操作同5。 9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘. 10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。 11. 測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘。 聚醋酸乙烯酯(Y0000792 聚丙烯酸酯 - 對(duì)照譜圖(P2170000 菊苣酸0 605 菊苣酸0 60-050 菊苣酸0 60 桔霉素0 6850 桔霉素0 685 酒石酸唑吡坦(Z2500000 酒石酸泰樂(lè)菌素 - 對(duì)照譜圖(T2880200 酒石酸長(zhǎng)春瑞濱(Y00006 景天庚酮糖亞硫酐19115-250 景天庚酮糖亞硫酐19115-050 金松雙黃酮190805 金圣草素,柯伊利素0 6 0 金黃紫堇堿1909 芥子酸19261-100 芥子酸192611 姜黃素 姜黃素 間苯三酚(Y00009 甲氧芐啶:用于系統(tǒng)適用性試驗(yàn)(Y000068 甲氧芐啶(T2200000 甲氧芐啶 雜質(zhì)B(T2200010 甲巰咪唑(Y0000 6 甲巰咪唑 雜質(zhì)C(Y0000 7 甲巰咪唑 雜質(zhì)A(Y0000 72 甲磺酸培高利特(Y0000010 甲磺酸培氟沙星(P0 09000 甲磺酸酚妥拉明 - 對(duì)照譜圖(P1109000 甲砜霉素(T1100000 甲苯噻嗪 雜質(zhì)E(Y0000159 甲苯噻嗪 雜質(zhì)C(Y0000158 甲苯磺丁脲;甲糖寧(T1700000 季戊四醇四硝酸酯(P000100 脊髓灰質(zhì)炎疫苗 (滅活 BRP (干冰運(yùn)輸(P2160000 |
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