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鮭魚降鈣素(SCT)elisa試劑盒操作步驟發(fā)表時間:2021-06-30 16:41 鮭魚降鈣素(SCT)elisa試劑盒操作步驟: 1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,在di一、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,然后在di一、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后從di一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為180 ng/L,120 ng/L ,60 ng/L,30 ng/,15 ng/L)。 2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。 3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。 4. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。 5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。 6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。 7. 溫育:操作同3。 8. 洗滌:操作同5。 9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘. 10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。 11. 測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘。 磷酸化非受體酪氨酸激酶c-Abl抗體 磷酸化細(xì)胞質(zhì)膜微囊蛋白-1抗體 磷酸化周期素依賴激酶2抗體 磷酸化細(xì)胞分裂周期蛋白25C抗體 磷酸化周期素依賴性激酶2抗體 細(xì)胞質(zhì)膜微囊蛋白-3抗體 3號染色體開放閱讀框34抗體 CD134抗體 單核細(xì)胞趨化蛋白5抗體 髓鞘相關(guān)糖蛋白CD57抗體 細(xì)胞角蛋白13抗體 白細(xì)胞免疫球蛋白樣受體-B抗體 CD33L抗體 細(xì)胞角蛋白10抗體 軸突生長因子CD108抗體 唾液酸結(jié)合性免疫球蛋白樣凝集素5抗體 CD329抗體 嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白14抗體 1號染色體開放閱讀框57抗體 2號染色體開放閱讀框18抗體 細(xì)胞色素c氧化酶6抗體 嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白24抗體 巨噬細(xì)胞炎性蛋白15 巨噬細(xì)胞炎性蛋白抗體 CD72蛋白抗體 中心體蛋白128抗體 著絲粒蛋白O抗體 3號染色體開放閱讀框17抗體 |
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