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倉鼠組織蛋白酶K ELISA試劑盒操作步驟發(fā)表時間:2021-06-03 15:57 倉鼠組織蛋白酶K ELISA試劑盒操作步驟: 1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,在di一、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,然后在di一、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后從di一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為180 ng/L,120 ng/L ,60 ng/L,30 ng/,15 ng/L)。 2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。 3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。 4. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。 5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。 6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。 7. 溫育:操作同3。 8. 洗滌:操作同5。 9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘. 10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。 11. 測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘。 磷酸化活化復(fù)制因子2抗體 磷酸化活化復(fù)制因子2抗體 磷酸化活化復(fù)制因子2抗體 磷酸化活化復(fù)制因子2抗體 活化轉(zhuǎn)錄因子5抗體 活化轉(zhuǎn)錄因子6β抗體 AICAR甲?;D(zhuǎn)移酶抗體 磷酸化毛細血管擴張性共濟失調(diào)癥突變蛋白抗體 ATP5E蛋白抗體 ATP5G2蛋白抗體 ATP6V0D2蛋白抗體 ATP6V1B2蛋白抗體 ATPIF1蛋白抗體 Attractin蛋白抗體 磷酸化有絲分裂激酶B抗體 肌動蛋白相關(guān)蛋白M1抗體 ALKB蛋白抗體 乙酰輔酶A酰基轉(zhuǎn)移酶1抗體 磷酸化β-肌動蛋白抗體 磷酸化腎上腺素能受體β2/β2-AR 抗體 磷酸化腎上腺素能受體β2/β2-AR抗體 載脂蛋白D抗體 酸敏感離子通道1抗體 雙鏈RNA腺苷酸脫氨基酶抗體 髓系、淋巴、混合系白血病易位基因10抗體 腺苷酸環(huán)化酶1抗體 腺瘤樣息肉抗體 溶血磷脂?;D(zhuǎn)移酶抗體 錨蛋白重復(fù)及SAM結(jié)構(gòu)域蛋白3抗體 |
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