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人基質(zhì)金屬蛋白酶9ELISA 標(biāo)準(zhǔn)品樣品收集發(fā)表時間:2020-05-14 16:47 人基質(zhì)金屬蛋白酶9ELISA 標(biāo)準(zhǔn)品樣品收集: 1.血清:全血樣品于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000×g離心20分鐘,取上清即可檢測,收集 血液的試管應(yīng)為一次性的無熱原,無內(nèi)毒素試管。 2.血漿:抗凝劑推薦使用EDTA-Na2,樣品采集后30分鐘內(nèi)于1000×g離心15分鐘,取上清即可 檢測。避免使用溶血,高血脂樣品。 3.組織勻漿:用預(yù)冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細胞會 影響測量結(jié)果),稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應(yīng)體積的PBS(一般按1:9的重量體 積比,比如1g的組織樣品對應(yīng)9mL的PBS,具體體積可根據(jù)實驗需要適當(dāng)調(diào)整,并做好記錄。 推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨。為了進一步裂解組 織細胞,可以對勻漿液進行超聲破碎,或反復(fù)凍融。最后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘, 取上清檢測。 4.細胞培養(yǎng)上清:取細胞培養(yǎng)上清于1000×g離心20分鐘,除去雜質(zhì)及細胞碎片。取上清檢測。 5.其它生物樣品:1000×g離心20分鐘,取上清即可檢測 具體處理方法可參考: 6.樣品應(yīng)清澈透明,懸浮物應(yīng)離心去除。 7.樣品收集后若在1周內(nèi)進行檢測的可保存于4℃,若不能及時檢測,請按一次使用量分裝,凍 存于-20℃(1個月內(nèi)檢測),或-80℃(6個月內(nèi)檢測),避免反復(fù)凍融。 8.如果您的樣品中檢測物濃度高于標(biāo)準(zhǔn)品最高值,請根據(jù)實際情況,做適當(dāng)倍數(shù)稀釋(建議先 做預(yù)實驗,以確定稀釋倍數(shù))。 |
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