大鼠芳香烴受體elisa試劑盒實驗注意事項

大鼠芳香烴受體elisa試劑盒實驗注意事項：

1加樣：

實驗樣本過多時，可分批次操作，以減少實驗時間延長造成的誤差；

加酶試劑后，用吸水紙吸干孔外試劑；

作定量試驗時，使用加樣器加注試劑，并經(jīng)常校正其準(zhǔn)確性，此外，要做到一份樣本一個移液頭，防止交叉污染。

2.溫育：

如有兩種溫度，盡量使用較低的溫育溫度、較長反應(yīng)時間的條件；

用1個小溫度計放置在板孔反應(yīng)液中測量觀察；

96孔板周圍孔與中心孔在溫育中的熱力學(xué)梯度會造成“邊緣效應(yīng)”，因此盡量采用水??；

3.洗板：

手工洗板時，拍板時要垂直，避免交叉污染，用力不能過猛，防止抗原抗體復(fù)合物脫離；

洗板機洗板時應(yīng)經(jīng)常檢查沖洗頭是否通暢，若被雜物堵塞時可用注射器針頭挑出；

為了洗滌效果好，實驗室可采用機器與人工洗滌相結(jié)合的方法，在機器洗滌后再進行人工洗板1-2次，或適當(dāng)增加洗板的次數(shù)；

實驗流程:

1.實驗前標(biāo)準(zhǔn)品、試劑及樣本的準(zhǔn)備；

2.加樣標(biāo)準(zhǔn)品及樣本50μL，37℃孵育30分鐘；

3.洗板5次，加酶標(biāo)試劑50ul，37℃孵育半小時；

4.洗板5次；加入顯色液A，B各50ul,37℃孵育顯色15分鐘

5.加終止液50μL，立即450nm讀數(shù)。

6.計算