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小鼠胱天蛋白酶11elisa試劑盒操作流程發(fā)表時(shí)間:2020-03-12 15:08 小鼠胱天蛋白酶11elisa試劑盒操作流程: 1待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl,每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔;設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。 2酶標(biāo)板置4℃,包被過(guò)夜。 3洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過(guò)洗一遍將洗滌液注滿板孔后,即甩去,之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。 4陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。 5酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。 6洗板,同4。 7每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。 8酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。 9洗板,同4。 10每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。 11每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。 |
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