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馬胃葡萄球菌PCR檢測試劑盒使用操作方法發(fā)表時間:2020-02-26 16:20 馬胃葡萄球菌PCR檢測試劑盒使用操作方法: 一、樣品 RNA 的制備 1、用自選方法抽提病毒樣品 RNA。注意:可以選用本公司**的一管式病毒 RNAout 2、或柱式病毒 RNAout。 二:RT(逆轉錄)反應合成 cDNA 1. 按下表配制 RT 反應體系(20 μL 體系) 2. 70℃保溫 5 分鐘變性模板后立即冰浴。 3. 嚴格按順序加入 6μL RT Buffer(含 dNTP)和 2μL MMLV 逆轉錄酶(含 RI), 反應終體積為 20μL。 4. 42℃保溫 60 分鐘。此步為 RT 反應。 5. 70℃保溫 10 分鐘以終止反應,然后放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以直接作為 PCR 模板使用,丌需要純化。 性能指標: 1.試劑盒檢測特異性為100% 2. 檢測試劑盒重現(xiàn)性為100% 3. 靈敏度可達到103/ml 4. 有效期為6個月 |
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