PCR試劑盒性質(zhì)闡述

PCR試劑盒性質(zhì)：又稱(chēng)基因體外擴(kuò)增技術(shù)或核酸體外擴(kuò)增技術(shù)。利用兩種與相反鏈雜交并利用附著于目標(biāo)DNA兩端的寡核苷酸引物在高溫(95℃)使含目標(biāo)DNA片段的DNA雙鏈變性，分解為單鏈。在較低溫度(37～63℃)與引物退火：然后變溫到72℃左右，在耐高溫DNA聚合物酶作用下引物被沿樣板DNA單鏈延伸合成互補(bǔ)鏈，然后又變性→退火→延伸反復(fù)進(jìn)行。引物大大過(guò)量，dNTP過(guò)量，酶在高溫中是較穩(wěn)定的，這樣經(jīng)過(guò)幾十個(gè)循環(huán)，目標(biāo)DNA片段就按2n數(shù)遞增。用此法可從mRNA中，cDNA庫(kù)中擴(kuò)增出目標(biāo)基因。過(guò)去一般合成500～1000bp較好，現(xiàn)已發(fā)展出大片段(75kb)的PCR，且差錯(cuò)甚少。PCR技術(shù)的發(fā)展還可用于定點(diǎn)突變，質(zhì)粒重組及FLP等方面。這一技術(shù)的作用范圍日益擴(kuò)大，已成為分子生物學(xué)工作者基本技術(shù)之一。這項(xiàng)專(zhuān)利技術(shù)1985年由美國(guó)塞特斯(Cetus)公司開(kāi)發(fā)。是20世紀(jì)80年代分子生物學(xué)領(lǐng)域中的一項(xiàng)革命性突破，已在分子生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、法學(xué)等領(lǐng)域發(fā)揮了極大的作用。